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技术分享昆虫杆状病毒表达系统

发布时间:2021-06-30     浏览次数 :0

昆虫杆状病毒表达载体系统

一种利用杆状病毒作为外源基因的载体,通过感染昆虫细胞或者昆虫幼虫来表达外源蛋白的系统,是重要的真核表达系统之一。

本公司利用经典Bac-to-Bac技术,打造了一个快速简便高效的杆状病毒表达平台。

该技术能够快速地产生重组病毒,而且不需要繁琐的空斑分析,大大提高了效率。蛋白生产的周期短,通量大。可以实现细胞从小规模培养到大规模发酵的过程,使得蛋白产物甚至可以达到50mg。提供免费的病毒离子扩增和储存服务,储存期长达半年。

优势明确,值得选择——

1) 杆状病毒安全性能好

2) 携带外源基因的容量大

3) 外源目的蛋白质表达水平高

4) 表达的真核基因产品可以进行正确的折叠与修饰,因而具有很好的生物活性

与哺乳细胞相比,昆虫表达系统的优势更加鲜明:

1) 培养条件相对简单,不需要通过CO2

2) 培养成本相对合理

3) 不容易被细菌污染

4) 得到的蛋白含量高

常见表达载体

图一 昆虫杆状病毒表达系统常见表达载体及特点

经典服务案例

Rsignal1 重组蛋白在Sf9细胞中的表达。

经过密码子优化的Rsignal1目的基因构建于昆虫表达载体上,转染Sf9细胞得P1代杆状病毒。通过一系列的病毒粒子放大与最适MOI的探索以及高得率的亲和纯化,最终得到了高质量的Rsignal1蛋白。

图2 P1表达测试

图3 MOI优化

图4 纯化结果

图5 最终结果(考马斯亮蓝染色)

艾柏森公司昆虫杆状病毒表达系统服务流程

  • 重组蛋白表达

    具备高效的哺乳动物细胞表达系统和丰富的蛋白表达经验,可实现重组蛋白高质量表达与制备。针对表达难度大且生物活性敏感的蛋白,可实现精准设计和优化表达策略,表达不成功不收费。

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  • 高通量鼠单抗筛选

    思格生物建立了高通量的鼠单抗筛选技术平台,单次筛选即可获得100~500株ELISA强阳性单克隆抗体,充分满足科研用抗体制备、单抗药物高通量筛选的需求,欢迎致电咨询与合作。

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  • 纳米抗体筛选

    具备鲨鱼免疫、羊驼免疫和骆驼免疫场所和基地,建立了噬菌体展示和哺乳动物细胞展示联合的高通量纳米抗体筛选平台,为客户提供从抗原制备、抗体筛选和抗体亲和力评估的抗体开发服务。

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  • 稳转细胞构建

    我们开发了非病毒依赖的稳转细胞构建技术,可实现大片段(20kb)、多基因(3-5个基因)在细胞基因组上的稳定整合,最快30天获得稳转株,为客户提供性价比极高的稳转细胞构建服务。

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